优势表达SphK-1基因对K562细胞生物学特性的影响

• 作者: 李庆芳 段海峰 王立生 达万明 黄文荣
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 鞘氨醇激酶-1 K562细胞 格列卫
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-22
• 页数: 3页
• 分类号: R733.7
• 字数: 2379字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2007.01.008

摘要

目的:了解优势表达鞘氨醇激酶-1(SphK-1)对慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞生物学特性的影响.方法:使用pLXSN、pLXSN-SphK-1的重组逆转录病毒液感染K562细胞并用终浓度1 000 ng/ml的G418筛选感染pLXSN和pLXSN-SphK-1基因的K562细胞;取对数生长期的K562-pLXSN和K562-SphK细胞提取蛋白收集胞浆蛋白,应用BCA-200蛋白检测试剂盒进行蛋白定量.根据蛋白定量取蛋白含量相同的蛋白提取上清行γ-32P-ATP掺入法检测K562-pLXSN和K562-SphK细胞SphK-1活性;并应用MTT法检测K562-pLXSN和K562-SphK细胞的增殖情况及对不同剂量格列卫的敏感性.结果:K562细胞转染SphK-1基因比转染空载体后的细胞SphK-1酶活性显著增高;K562-pLXSN细胞和K562-SphK细胞培养24 h、48和72 h后细胞增殖无显著性差异;当格列卫浓度为0.1和0.25 μmol/L时,K562-PLXSN和K562-SphK细胞培养72 h后的细胞存活率无明显差异;当格列卫浓度为0.5至10 μmol/L时,K562-SphK细胞存活率显著低于K562-PLXSN细胞(P＜0.05).结论:优势表达SphK-1基因对K562细胞自然增殖无显著影响,但增加了细胞对浓度高于0.5 μmol/L格列卫的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	达万明	解放军总医院血液科	108	514	12.0	14.0
2	黄文荣	解放军总医院血液科	50	298	10.0	15.0
3	段海峰	军事医学科学院放射医学研究所	46	256	9.0	14.0
4	王立生	军事医学科学院放射医学研究所	76	410	10.0	16.0
5	李庆芳	军事医学科学院放射医学研究所	15	61	4.0	7.0