乙酰肝素酶-siRNA表达载体的构建及其抑制黑素瘤细胞株体外侵袭能力的观察

• 作者: 丁颖果 刘晓艳 张妤 方德仁 方红 王懿娜 羊正纲 蒋筱凌 阮黎明
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 基因表达 黑色素瘤 乙酰肝素酶
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 676-679
• 页数: 4页
• 分类号: R9
• 字数: 3931字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2007.11.007

摘要

目的 构建针对人乙酰肝素酶(HPSE)基因的小干扰RNA(siRNA)及其表达载体,观察其对A375细胞HPSE基因的干扰作用及其对肿瘤细胞体外侵袭的抑制作用.方法 设计并构建了重组质粒pRNATU6.1/HPSE-siRNA,转染A375细胞,用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别测定HPSE基因RNA和蛋白水平的表达变化,Matrigel侵袭实验观察A375细胞体外侵袭能力的改变.结果 将针对HPSE基因的siRNA的双链寡核苷酸片段正确克隆到pRNATU6.1载体;转染A375细胞,与对照组比较,HPSE-siRNA组HPSE基因和蛋白的表达均明显降低.转染后肿瘤细胞的体外侵袭能力与对照组相比受到明显抑制.结论 成功构建了针对HPSE基因的siRNA载体,HPSE-siRNA转染A375细胞可以显著降低细胞HPSE基因和蛋白的表达.