H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆与表达

• 作者: 冯子良 宋学林 宋建领 张富强 张应国 张文东 李作生 王金萍 胡媛媛 范泉水 邱薇 郭松辉
• 来源期刊: 云南大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H5N1亚型 血凝素 表达
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 623-627
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3724字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-7971.2007.06.016

摘要

根据已知H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因序列设计、合成克隆引物.自灭活的云南地方H5N1亚型病毒阳性临床组织样品中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶(PyobestTM DNA Polymerase)扩增HA基因,采用Invitrogen定向表达系统(ChampionTM pET directional TOPO expression system)进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组HA,分子质量约78 ku.采用阳性血清经免疫印迹及ELISA分析重组HA的免疫反应性,结果表明重组HA能与H5N1亚型病毒抗血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性.