淡色库蚊性别差异表达cDNA文库的构建和分析

• 作者: 张仁利 张秀梅 张韶华 朱兴全 朱子立 程锦泉 耿艺介 陈虹虹 高世同 黄达娜
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 淡色库蚊 抑制消减杂交 性别差异表达基因
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 105-108,147
• 页数: 5页
• 分类号: R384.1
• 字数: 2569字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2007.02.002

摘要

目的 为探讨媒介与病原、媒介与宿主的相互作用,建立传播疾病的淡色库蚊性别差异表达cDNA文库,从而筛选阻断疾病传播的疫苗候选分子.方法 以淡色库蚊雌蚊成蚊为检测方(Tester)、雄蚊成蚊为驱动方(Driver),进行正向抑制性消减杂交;以雄蚊成蚊为Tester、雌蚊成蚊为Driver,进行反向抑制性消减杂交.将获得的正向抑制性消减杂交产物克隆入pGEM-T easy vector,并以菌液PCR扩增鉴定插入片段.随机抽取100个阳性克隆进行DNA序列分析.并将所得ESTs序列进行在线BLAST分析.结果 从100个阳性克隆中测得98个ESTs序列,在测定的序列中与已知基因具有同源性的有57个,其余41个ESTs与已知基因不具有同源性.结论 抑制性消减杂交技术建立雌蚊特异性基因文库,发现了淡色库蚊雌蚊新的ESTs序列,为性别相关基因的功能及性别调控,探讨媒介与病原、媒介与宿主的相互作用及其筛选传播阻断疫苗候选分子的研究奠定了基础.