H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化

• 作者: 冉多良 熊蕊 邓国华 陈化兰 黎玉梅
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 NA基因 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 783-786
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.5
• 字数: 3128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.09.012

摘要

用RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒(AIV)A/Duck/Zhejiang/12/OO中获得NA基因,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a中,将序列测定和双酶切验证准确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导,经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,重组蛋白得到了可溶性表达,表达的蛋白质分子质量为33 ku;该蛋白可以与禽流感H5N1亚型阳性血清反应,具有良好的免疫原性;ELISA 检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性.