H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化

• 作者: 冯丽丽 周玲 张改平 李清州 杨苏珍 王丽 罗俊 郝惠芳
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 H5亚型 神经氨酸酶(NA) 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 页码范围: 107-110
• 页数: 4页
• 分类号: S858.31
• 字数: 3064字
• 语种: 中文

摘要

参考GenBank上发表的H5亚型禽流感病毒(AIV)神经氨酸酶(NA)基因序列设计引物,PCR扩增NA基因,再将其克隆到原核表达载体pET-32a中,用E.coli BL21(DE3)原核表达,SDS-PAGE和Western-blot对表达蛋白进行鉴定.Western-blot结果表明,表达产物具有免疫学活性,蛋白的分子量约为61 kDa,位于包涵体中.包涵体经变性、复性处理,表达蛋白能与H5亚型AIV阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性.ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性.