促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1相互作用的筛选和鉴定

• 作者: 刘涛 张翠莉 成海恩 杨晓明 王应雄
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Smac/DIABLO NR4A1 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 482-485
• 页数: 4页
• 分类号: Q503|Q51|Q785
• 字数: 4413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2007.06.005

摘要

目的 利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白.方法 ①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu-Smac/DIABLO.②pDBLeu-Smac/DIABLO诱饵质粒转化酵母MaV203,Western blot检测融合蛋白在酵母中的正确表达,自激活作用的检测并确定抑制His基础表达的3AT浓度.③对成人肝cDNA文库的筛选.选择能同时激活His、Ura、LacZ 3个报告基因的克隆为阳性,利用回转实验和GST-pull down对阳性克隆进行鉴定.结果 成功构建pDBLeu-Smac/DIABLO载体,转化酵母细胞MaV203,无细胞毒性,无自激活作用,3AT浓度为25 mmol/L.经回转实验和GST-pull down证实了线粒体促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1之间具有相互作用.结论 Smac/DIABLO可能通过与核受体NR4A1的相互作用来影响核受体NR4A1对细胞生存或者凋亡的调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨晓明	军事医学科学院放射医学研究所	88	536	11.0	19.0
2	王应雄	重庆医科大学公共卫生学院生殖医学系遗传学教研室	165	620	13.0	17.0
3	成海恩	重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	7	22	4.0	4.0
4	刘涛	第三军医大学西南医院全军感染病研究所	62	463	11.0	18.0
5	张翠莉	重庆医科大学公共卫生学院生殖医学系遗传学教研室	4	14	2.0	3.0