紫杆柽柳谷胱甘肽硫转移酶基因的克隆及功能鉴定

• 作者: 姜静 尹维波 李集临 杨平 王玉成 胡军 胡赞民 陈宇红
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 紫杆柽柳 谷胱甘肽硫转移酶 基因克隆 原核表达 酶活性检测
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 76-80
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.01.016

摘要

根据GenBank已公布的植物谷胱甘肽硫转移酶基因EST序列设计引物,利用3'和5'RACE方法,获得紫杆柽柳GST基因(TaGST)全长cDNA序列,全长为1 175 bp,开放读码区672 bp,编码224个氨基酸(GenBank accission No.DQ683363).其所编码的蛋白与大豆的GST10同源性为48%.利用pET-28a(+)构建了紫杆柽柳(Tamarix androssowii)GST基因的原核表达载体,转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21进行了原核表达.诱导表达蛋白的SDS-PAGE检测表明,所表达的蛋白分子量约为26kD.初步的酶学活性检测表明,所克隆的基因编码的肽段具有催化GST蛋白通用底物CDNB(1-氯-2,4-二硝基苯)和GSH(还原型谷胱甘肽)反应的活性.