hTERT启动子的克隆及在MCF7乳腺癌细胞中的特异转录活性

• 作者: 姚智 李晓霞 王宝利
• 来源期刊: 中国癌症杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hTERT 启动子 乳腺癌 特异转录活性
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 68-71
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2308字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3639.2007.01.017

摘要

背景与目的:利用肿瘤特异性启动子增强肿瘤细胞中治疗基因的转录选择性是达到基因治疗靶向性的有效途径.人端粒酶催化亚基(hTERT)在大部分肿瘤细胞中呈特异性高表达[1-2],有可能成为肿瘤特异性启动子.本文扩增了hTERT基因启动子并分别克隆于报告基因重组质粒pEGFP-1和pGL3-Basic,检测并证实hTERT启动子在乳腺癌细胞MCF7中的特异转录活性.方法:采用套式PCR法扩增hTERT启动子,将其分别克隆到含报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的重组质粒pEGFP-1和含Luciferase的重组质粒pGL3-Basic,经脂质体分别转染人乳腺正常上皮细胞系HBL100和乳腺癌细胞MCF7,荧光显微镜观察EGFP的表达情况,并测定两种细胞中荧光素酶转录表达差异.结果:与正常细胞HBL100相比,hTERT启动子在MCF7细胞呈现强的绿色荧光表达;荧光素酶活性检测与其二致,hTERT启动子在MCF7乳腺癌细胞的荧光素酶相对活性RLU/U值(33784)约相当于HBL100细胞中(2 400)的15倍.结论:hTERT启动子在乳腺癌MCF7细胞中具有很强的特异性,为进一步开发肿瘤的特异性基因治疗奠定实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚智	天津医科大学基础医学院免疫学教研室	137	1428	20.0	33.0
2	李晓霞	天津医科大学基础医学院微生物学教研室	63	347	8.0	16.0
3	王宝利	天津医科大学基础医学院代谢病医院内分泌研究所	43	222	9.0	13.0