马立克病病毒gB主要抗原决定簇融合基因的真核表达

• 作者: 刘佩红 周锦萍 孙泉云 徐锋 沈莉萍 王建 葛菲菲
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 真核表达 马立克病病毒 抗原决定簇 转染
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 26-30
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 3032字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-5038.2007.09.007

摘要

为了合成由HA表位和串联的马立克病病毒(MDV)gB主要抗原决定簇基因所构成的融合蛋白基因,并在真核中表达,选取了MDV GA株gB 250位～460位氨基酸为目的片段,应用基因重组技术,通过一个由柔性氨基酸组成的linker,使该基因片段在体外串联,并在串联片段的前端加上HA表位,末端加上终止密码子,以形成完整的阅读框;通过测序分析证明,引入的HA表位序列以及融合基因的阅读框完全正确.将融合基因克隆入真核载体pIRES中,从而获得真核表达质粒pCMV-HAgB(L),利用脂质体将该表达质粒转染CHO细胞,通过间接免疫荧光(IFA)和RT-PCR鉴定,发现该融合基因可以在真核细胞中正确表达,为开发新型的马立克病疫苗奠定了基础.