重组G145R HBsAg亲和纯化方法的建立及其应用

• 作者: 张春燕 张波 李方和 李时君 杨东亮 田拥军 陈妍 黄永国 龚劲松
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎表面抗原 免疫逃逸变异株 单克隆抗体 亲和层析
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 767-770
• 页数: 4页
• 分类号: R512.62|R392.11
• 字数: 3739字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.10.016

摘要

目的 建立重组乙型肝炎病毒G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法.方法 用抗-HBs单克隆抗体(D12-McAb)制备亲和层析胶,对2A8细胞(分泌G145R变异HBsAg)培养上清盐析物进行亲和纯化.采用SDS-PAGE、Western blot 及ELISA,对纯化产物的纯度、特异性、含量和回收率进行鉴定,并与同法纯化的HBsAg阳性血清及r-wHBsAg提取物进行比较.结果 D12-McAb对重组真核表达G145R变异HBsAg、HBsAg阳性血清及r-wHBsAg三者具有相似的亲和性,产物纯度分别为90.3%、95.2%和93.1%,回收率分别为43.3%、72.0%和66.4%.结论 已成功地建立了重组G145R变异HBsAg抗体亲和纯化方法,为G145R变异以及其他HBV免疫逃逸变异感染的深入研究奠定了重要的技术基础.