重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化方法比较研究

• 作者: 余宙耀 粟宽源 陈文吟 饶桂荣
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗HBsAg Fab抗体 亲和层析 离子交换-分子筛 纯化
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 342-344
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 3030字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2005.04.022

摘要

目的研究重组人抗HBsAg Fab抗体的纯化条件.方法采用羊抗人Fab抗体亲和层析柱、14F7单克隆抗体亲和层析柱、离子交换-分子筛层析柱,分别纯化由酵母工程菌(GS115/Fab)发酵的重组人抗HBsAg Fab抗体,并对3种纯化方法所得Fab抗体的纯度、收率、与HBsAg的结合活性进行比较.结果 3种纯化方法中,14F7单克隆抗体柱纯化的Fab抗体的纯度达98%左右,Fab抗体柱纯化的Fab抗体的纯度为95%,但这两种亲和柱的目的蛋白收率都不高,分别为35%、55%.而离子交换柱纯化的Fab抗体的纯度为93.8%,经分子筛柱进一步纯化后,可达98%以上,Fab抗体蛋白收率可达80%以上.经ELISA分析,3种方法纯化的Fab抗体均具有较高的HBsAg抗原结合力和特异性.结论通过对3种纯化方法的比较得出,离子交换-分子筛层析法是重组人抗HBsAg Fab抗体的最佳纯化方法,这为抗HBsAg Fab抗体的产业化生产和临床研究打下良好基础.