重组人促甲状腺激素β亚基的切胶纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 孙蓓 左爱军 李敬华 柳明波 梁东春 郭刚 马彦
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人促甲状腺激素 免疫 人促甲状腺激素抗体 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 428-431
• 分类号: R392.6
• 字数: 4121字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2010.05.010

摘要

目的:切胶纯化重组人促甲状腺激素亚基(hTSHβ),免疫家兔制备多克隆抗体,为人TSH测定试剂盒的国产化奠定基础.方法:将含有重组人促甲状腺激素β亚基(hTSHβ)的大肠杆菌表达产物进行SDS-PAGE分离,切取相应分子量的蛋白条带,研磨回收后用于免疫新西兰大耳朵白兔,ELISA监测血清中抗hTSHβ抗体的效价,饱和硫酸铵沉淀及亲和层析自血清中纯化抗体.结果:切胶后获得了高纯度的重组GST-hTSHβ蛋白,所免疫家兔产生了针对hTSHβ的多克隆抗体,效价可达1:12 000. 结论:切胶纯化的重组hTSHβ蛋白可成功诱导兔产生高效价的抗hTSHβ多克隆抗体.