重组人源抗HBsAg单链抗体的纯化及亲和常数测定

• 作者: 严兴 任向荣 余宙耀 唐永红 姚汝华 熊盛 粟宽源 郑业华
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎,乙型 抗体 包涵体 抗体亲和力
• 年，卷（期）: 2002,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1069-1073
• 页数: 5页
• 分类号: R512.6+2
• 字数: 4545字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2002.09.012

摘要

目的:对融合6×His标签的人源抗乙型肝炎表面抗原单链抗体的包涵体进行纯化和复性,并对复性产物的抗原结合性质进行鉴定.方法: 工程菌表达的包涵体裂解后,金属螯合亲合层析纯化,然后以尿素透析、盐酸胍透析和金属螯合亲和层析柱原位复性3种方法进行复性;复性产物以免疫亲和层析精制,非竞争酶免疫法测定亲和常数结果:盐酸胍透析复性产物的比活性最高,蛋白回收率为(61.08±1.45)%;精制后的重组单链抗体的亲和常数为(2.30±0.32)×107 L/mol. 结论: 本株单链抗体可以应用优化的透析复性技术,在体外高效复性,其抗原结合性质不受N末端纯化标签的影响.