人源性抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌中的表达及活性测定

• 作者: 任向荣 余宙耀 唐永红 熊盛 粟宽源 郑业华 陈文吟
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体表面呈现 乙型肝炎表面抗原 单链抗体 表达 复性 生物活性
• 年，卷（期）: 2002,（12）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 824-827
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3710字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备有活性的人源性抗HBsAg单链抗体.方法:应用噬菌体表面呈现技术获得人抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)抗体的Fab片段,并将VH和VL基因以(Gly4Ser)3linker连接成单链,插入表达载体pQE40,筛选大肠杆菌高表达菌株.结果:工程菌表达优化试验表明,在OD600为0.6时开始诱导,持续6 h,目的蛋白表达量最高可达菌体总蛋白的31%.包涵体变性后上样镍离子螯合层析柱一步纯化,收集目的峰,透析复性,得纯度为97%的重组单链抗体,其亲和常数为0.23×108mol/L.结论:抗HBsAg单链抗体在大肠杆菌内获得高效表达,经变性和复性,得到有活性的单链抗体,氨基酸组成正确.为进行临床前研究打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余宙耀	解放军第458医院全军传染病中心	29	157	7.0	11.0
2	任向荣	解放军第458医院全军传染病中心	4	32	4.0	4.0
3	陈文吟	解放军第458医院全军传染病中心	10	61	5.0	7.0
4	粟宽源	解放军第458医院全军传染病中心	9	72	5.0	8.0
5	唐永红	解放军第458医院全军传染病中心	17	62	5.0	6.0
6	郑业华	解放军第458医院全军传染病中心	3	13	2.0	3.0
7	熊盛	华南理工大学生物工程系	5	45	4.0	5.0