抗人HAb18G分子单链抗体基因的构建及在大肠杆菌中的分泌表达

• 作者: 姚西英 杨向民 王永庆 邢金良 陈志南
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝癌 单链抗体 分泌表达
• 年，卷（期）: 2003,（7）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 479-482
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3526字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建抗人HAb18G分子单链抗体基因,并在大肠杆菌中进行分泌表达.方法:通过连接肽(Gly4Ser)3基因序列将已成功克隆的抗人肝癌单抗HAb18轻、重链可变区基因拼接成单链抗体(ScFv)基因,并在5′和3′端引入相应的酶切位点,克隆至改造的分泌性表达载体pCANTAB 5His之中,转化到E.coli HB2151中进行诱导表达.亲和层析纯化表达蛋白后,以SDS-PAGE电泳、Western blot及ELISA等方法分析检测表达产物.结果:经限制性酶切鉴定及DNA测序分析,证实基因构建正确.SDS-PAGE电泳和Western blot分析表明ScFv基因在大肠杆菌中成功表达.表达产物的相对分子质量(Mr)为31 kD,与理论预期值相符,并且可与相应的抗原特异结合.结论:成功实现了抗人HAb18G分子单链抗体的原核分泌表达,为其在人肝癌诊治中的进一步应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈志南	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	114	603	12.0	18.0
2	邢金良	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	35	135	8.0	9.0
3	杨向民	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	25	102	6.0	8.0
4	王永庆	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	3	22	3.0	3.0
5	姚西英	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	13	82	5.0	9.0