抗AIF单链抗体在大肠杆菌中的可溶性表达和鉴定

• 作者: 游上游 艾洪武 郭军庆
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单链抗体 酸性同功铁蛋白 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 302-306
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4276字
• 语种: 中文

摘要

目的:获得具有生物活性的抗酸性同功铁蛋白(AIF)单链抗体(scFv).方法:将AIF4c9 scFv基因亚克隆于原核表达载体pPOW3,构建重组表达质粒pPOW4c9,电转化大肠杆菌DH5α,以温度诱导重组抗AIF scFv表达,经镍螯合层析柱纯化后,用ELISA和Western blot检测表达蛋白与AIF的结合特性.结果:抗AIF scFv抗体在大肠杆菌中获得可溶性表达,亲和力常数KD为3.18×10-8 mol/L;纯化后的可溶性AIF scFv含量约为1.6 mg/L.重组蛋白能特异识别AIF,并且具有良好的抗体生物学活性.结论:在大肠杆菌中表达并纯化了特异性可溶性抗AIF scFv抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	游上游	武汉市儿童医院检验部	22	66	5.0	7.0
2	艾洪武	武汉市儿童医院检验部	18	105	6.0	10.0
3	郭军庆	武汉市儿童医院检验部	3	0	0.0	0.0