人可溶性TNF受体(sTNFRI)在大肠杆菌中的表达及其活性鉴定

• 作者: 冯玮 叶飞 姜晓丹 尹丙姣 徐勇 李卓娅 熊平 龚非力
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 可溶性TNF受体 基因表达 胞毒效应
• 年，卷（期）: 2002,（11）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 743-746
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3331字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人可溶性TNF受体I(sTNFRI)基因表达载体,并在大肠杆菌中高效表达.方法:用RT-PCR扩增编码人TNFRI胞外段基因片段,将其插入到表达载体pET-28a,并转入大肠杆菌进行表达.结果:在IPTG诱导下,转入外源基因的大肠杆菌BL-21可高效表达sTNFRI蛋白,SDS-PAGE显示在27 KD处有一特异表达条带,其表达量占菌体蛋白总量的31%.纯化的sTNFRI可有效封闭TNF对L929细胞的胞毒效应;间接免疫荧光显示它可特异性抑制TNF与靶细胞TNFR的结合.结论:通过基因工程技术获得了人sTNFRI重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚非力	华中科技大学同济医学院免疫学教研室	80	364	10.0	13.0
2	冯玮	华中科技大学同济医学院免疫学教研室	41	149	7.0	10.0
3	姜晓丹	华中科技大学同济医学院免疫学教研室	25	84	5.0	8.0
4	徐勇	华中科技大学同济医学院免疫学教研室	50	232	8.0	13.0
5	尹丙姣	华中科技大学同济医学院免疫学教研室	18	72	5.0	7.0
6	李卓娅	华中科技大学同济医学院免疫学教研室	55	184	7.0	10.0
7	叶飞	华中科技大学同济医学院免疫学教研室	50	226	8.0	12.0
8	熊平		1	5	1.0	1.0