抗A型肉毒毒素人源单链抗体的表达、纯化及结合活性分析

• 作者: 王慧 荫俊
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: A型肉毒毒素 人源单链抗体 表达 纯化 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 414-416
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.05.004

摘要

目的:实现特异性抗A型肉毒毒素人源单链抗体(ScFv)的表达与纯化,并进行结合活性分析.方法:克隆单链抗体基因ScFv(VH-Linker-Vk),利用pET22b表达载体构建重组表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG化学诱导,固相亲和层析纯化蛋白,ELISA测定其特异结合活性.结果:pET22b可稳定表达人源单链抗体基因,表达产物占全菌蛋白的25%,表达蛋白全部以包涵体形式存在于胞内.经IMAC纯化,蛋白纯度大于95%.竞争性ELISA测定结果表明,重组抗毒素在体外具有良好的活性,可竞争肉毒马血清与肉毒毒素结合.结论:采用原核表达系统可实现抗A型肉毒毒素人源单链抗体的高效表达,重组人源单链抗体具有抗原特异结合活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	荫俊	军事医学科学院微生物流行病研究所	50	131	6.0	9.0
2	王慧	军事医学科学院微生物流行病研究所	48	107	5.0	8.0