从人源天然ScFv噬菌体抗体库中筛选A型肉毒毒素特异性抗体

• 作者: 乔玉玲 卢卫嘉 张超 毛晓燕 熊颖 马瑞
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体抗体库 A型肉毒毒素 筛选
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1093-1096,1100
• 分类号: Q81
• 字数: 4173字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.12.009

摘要

目的:以不同形式的A型肉毒毒素或类毒素为靶抗原,对已经构建的人源天然ScFv噬菌体抗体库进行特异性抗体的筛选及特异性抗体的序列分析.方法:制备3种不同形式的A型肉毒毒素或类毒素,抗原梯度包被免疫管,对人源天然ScFv噬菌体抗体库进行筛选,经过3轮"吸附-洗脱-扩增"淘选富集,制备单克隆噬菌体抗体颗粒,用ELISA验证ScFv的结合活性,并对获得的阳性克隆进行基因序列分析.结果:用3种不同形式的抗原进行筛选,各挑180个克隆进行单克隆噬菌体抗体颗粒的ELISA分析,其中以A型肉毒类毒素筛选获得52个阳性克隆,阳性率为28.8%,随机挑取12个克隆测序,结果表明7个ScFv序列正确且各不相同;以纯化后A型肉毒神经毒素(BONT/A)筛选获得18个阳性克隆,阳性率为10%,测序结果表明获得的14个ScFv序列正确且各不不同;以原核表达的A型肉毒毒素重链C段筛选获得122个阳性克隆,阳性率为68%,随机挑取55个克隆测序,结果表明30个正确的ScFv序列中14个系列完全相同,16个序列各不相同;结论:应用固相筛选的方法,从人源天然ScFv噬菌体抗体库可以获得肉毒毒素特异性抗体,为抗肉毒毒素马血清的更新替换提供了研究依据与应用基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张超		8	20	3.0	4.0
2	熊颖		8	15	2.0	3.0
3	卢卫嘉		4	21	3.0	4.0
4	毛晓燕		17	72	4.0	7.0
5	乔玉玲		10	56	3.0	7.0
6	马瑞		6	19	2.0	4.0