EB病毒融合基因重组腺病毒表达载体的构建

• 作者: 山长武 朱伟 罗兵 陈廷
• 来源期刊: 济宁医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: LMP2A BZLF1 融合基因 腺病毒 表达载体
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 29-32
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2887字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9760.2007.01.008

摘要

目的 构建EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2A(LMP2A)编码基因和即刻早期基因(BZLF1)融合基因的重组腺病毒表达载体.方法 逆转录-聚合酶链反应分别获得LMP2A和BZLF1编码序列的cDNA,采用剪接式重叠延伸(spliced overlap exetension,SOE)技术将两段基因通过多肽接头(Gly4Ser)3 的DNA 序列进行连接,构建融合基因Z2A.将融合基因Z2A定向亚克隆到pAdTrack-CMV 质粒上,在原核细胞E.coli BJ5183中完成穿梭质粒与骨架质粒pAdEasy-1的同源重组,构建融合基因Z2A真核表达载体pAd-Z2A.经抗生素培养板筛选重组体,然后转染293细胞,获得复制缺陷型重组腺病毒vAd-Z2A.结果 重组腺病毒载体经限制性核酸内切酶酶切,电泳后可观察到长31kb和4.5kb两条DNA条带,测序鉴定结果表明序列正确;从感染重组腺病毒vAd-Z2A的293细胞中检测到融合基因Z2A的表达.结论 本研究成功地构建了EBV LMP2A和BZLF1融合基因Z2A重组腺病毒表达载体,为进一步研究Z2A的功能提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗兵	青岛大学医学院微生物学教研室	216	931	14.0	19.0
2	陈廷	济宁医学院微生物学教研室	92	356	9.0	14.0
3	山长武	济宁医学院微生物学教研室	27	78	6.0	7.0
4	朱伟	济宁医学院微生物学教研室	17	37	3.0	5.0