栓菌420漆酶C基因的克隆、高效表达及重组酶的染料脱色潜能

• 作者: 李剑凤 洪宇植 肖亚中
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Trametes sp.420 真菌漆酶 异源表达 染料脱色
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 54-58
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 字数: 3956字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.01.012

摘要

根据漆酶铜结合保守区氨基酸序列设计简并引物,从新型漆酶合成菌株栓菌420(Trametes sp.420)基因组DNA扩增得到一新的漆酶同工酶基因(lacC)片段,应用长距离反向PCR技术获得其两端侧翼序列.克隆得到的lacC序列长3640bp,包括长2263bp的开放读码框及5'和3'-非编码区.lacC cDNA序列长1560bp,编码一519aa的多肽.推导的LacC蛋白序列内部存在有10个潜在的N-糖基化位点和4个铜原子结合区.将不含自身信号序列的lacC cDNA以pPIC9载体为媒介克隆到表达载体pPIC9K上,转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115细胞.重组菌在含有0.3mmol/L CuSO4和0.8%丙氨酸的BMM培养基中20℃培养9d,重组漆酶(rLacC)产量达到1.62×104U/L.用发酵粗酶液对终浓度50mg/L的染料进行脱色实验,结果表明,6U/L的rLacC对测试的三甲基类和偶氮类染料具有良好的脱色作用,小分子介体ABTS和HBT能够提高rLacC对染料的脱色效率和脱色速度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖亚中	安徽大学生命科学学院和现代实验技术中心	39	868	19.0	29.0
2	洪宇植	安徽大学生命科学学院和现代实验技术中心	9	127	7.0	9.0
3	李剑凤	安徽大学生命科学学院和现代实验技术中心	1	20	1.0	1.0