稳定表达CD200的U937细胞株的建立

• 作者: 侯治富 郝兵 高嵩
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: CD200 U937细胞 电转染 流式细胞术
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1019-1021,1025
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3227字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建稳定表达CD200蛋白的人单核细胞系U937细胞株,为研究该基因的作用机制奠定基础.方法:用电转染基因法将含有人CD200 cDNA的真核表达载体pcDNA3-CD200质粒和pcDNA3质粒分别转入人单核细胞系U937细胞中,经G418筛选,转染阳性细胞连续传代培养,并应用RT-PCR及流式细胞术检测CD200 mRNA和蛋白表达情况.结果:经G418筛选,U937细胞全部死亡,转染pcDNA3质粒和pcDNA3-CD200重组质粒的U937细胞存活,并可连续传代培养30代;转染pcDNA3-CD200重组质粒的U937细胞RT-PCR检测有一特异性扩增带;流式细胞术检测CD200表达结果显示:转染pcDNA3-CD200重组质粒的U937细胞CD200表达阳性细胞率(77.20%)显著高于转染pcDNA3质粒(3.20%)和U937细胞组(2.10%)(F=133 996.40,P＜0.01);各代间差异无显著性(F=1.03,P＞0.05).结论:用基因转染法成功地建立了稳定表达CD200蛋白的人单核细胞株U937-pcDNA3-CD200.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯治富	吉林大学中日联谊医院中心实验室	39	277	8.0	16.0
2	高嵩	浙江大学医学院附属第二医院检验科	7	32	3.0	5.0
3	郝兵	浙江大学第一附属医院卫生部多器官联合移植重点实验室	1	0	0.0	0.0