氧相关HRE启动子控制下表达hVEGF165基因重组2型腺相关病毒的获得及鉴定

• 作者: 张中明 张宜乾 董红燕 闫英群
• 来源期刊: 徐州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 重组腺相关病毒 血管内皮细胞生长因子 低氧反应元件
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 71-74
• 页数: 4页
• 分类号: R654.2
• 字数: 2961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2065.2007.02.001

摘要

目的 包装及鉴定低氧反应元件(HRE)启动子控制下缺氧诱导目的基因hVEGF165基因表达的2型重组腺相关病毒.方法 磷酸钙三质粒共转染方法将pAAV-HRE9-VEGF165、pAAV-Rep/cap、pHelper质粒转染HEK293T细胞,制备2型重组腺病毒相关病毒(rAAV2).分离培养S-D大鼠心肌细胞,转染rAAV,细胞固定后做免疫细胞荧光染色,检测细胞内血管内皮细胞生长因子(VEGF165)蛋白的表达.结果 pAAV-HRE9-VEGF165质粒经测序鉴定,结果与NCBI GenBank公布的人VEGF165 cDNA核苷酸序列(AB021221)完全一致,含HRE启动子及目的基因hVEGF165的2型重组非复制型腺相关病毒包装成功,可感染原代培养的大鼠心肌细胞,缺氧可诱导VEGF165蛋白表达.结论 成功包装并鉴定了rAAV-HRE9-hVEGF165载体,可有效转染心肌细胞, VEGF165基因的适时表达,为缺血性心肌疾病的"分子搭桥"治疗提供了更可能的安全性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董红燕	徐州医学院神经生物研究中心	68	200	7.0	10.0
2	张宜乾	徐州医学院附属医院胸心外科	21	68	5.0	7.0
3	张中明	徐州医学院附属医院胸心外科	91	190	7.0	9.0
4	闫英群	徐州医学院附属医院胸心外科	3	17	2.0	3.0