可调控重组腺相关病毒对MCF-7细胞基因转染效率及表达的研究

• 作者: 曾赵军 李子博 罗赛群 胡维新 陈迁
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 腺相关病毒 Tet-On基因 HSVtk基因 乳腺肿瘤 基因治疗
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 667-670,738
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 4265字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2007.09.007

摘要

目的 探讨Tet调控下自杀基因HSVtk重组腺相关病毒载体(rAAV/HSVtk/Tet-On) 对人乳腺癌细胞株(MCF-7)的作用.方法 将HSVtk和Tet-On基因分别定向克隆入腺相关病毒质粒pAAV MCS中, 构建重组腺相关病毒载体pAAV/TRE/HSVtk/Tet-On,与辅助质粒pAAV-RC、pHelper和包装细胞293进行包装、纯化.用β半乳糖苷酶原位染色法检测报告基因rAAV/LacZ在MCF-7中的表达,计算其基因转染效率.采用斑点杂交、RT-PCR检测MCF-7细胞基因组中HSVtk基因整合、病毒滴度及其表达. 结果 rAAV/HSVtk/Tet-On病毒滴度为2.38×1011 particle/ml, LacZ基因在感染的MCF-7中能持续表达,感染效率为20% ～30%.纯化后的重组腺相关病毒感染MCF-7后,能将目的基因转移到靶细胞中,并在Dox诱导下,使GCV对rAAV感染的MCF-7细胞具有明显的杀伤作用. 结论 HSVtk/Tet-On自杀基因调控系统可通过重组腺相关病毒载体成功转染人乳腺癌细胞株MCF-7, 使其HSVtk mRNA表达增加, 在Dox诱导下,GCV对rAAV(≥104v.p/cell)感染的MCF-7细胞具有明显的杀伤作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曾赵军	中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心	26	120	6.0	10.0
2	胡维新	中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心	84	547	13.0	21.0
3	罗赛群	中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心	17	66	5.0	7.0
4	李子博	中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心	4	11	1.0	3.0
5	陈迁	中南大学生物科学与技术学院分子生物学研究中心	5	17	2.0	4.0