犬白细胞介素2在毕赤酵母中的诱导表达及生物活性的测定

• 作者: 张汇东 徐汉坤 曹瑞兵 朱骞 缪勤 葛菲菲 陈溥言
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 犬 IL-2基因 毕赤酵母 诱导表达 生物学活性
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 574-578
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3502字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.04.006

摘要

以ConA刺激的犬外周血淋巴细胞总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出犬IL-2成熟蛋白基因,将目的片段连接到pMD18-T载体,测序结果显示,扩增片段与GenBank上的序列一致.然后将目的片段连接到酵母表达载体pPICZa-A上,得到重组酵母犬IL-2表达载体pPICZaA-CaIL-2,经Sac Ⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株(Pichia pastoris)X-33.PCR方法筛选重组酵母菌,甲醇诱导表达,SDS-PAGE结果显示,表达上清中有大小约20 kD的目的条带,比实际分子量略大,推测蛋白可能发生糖基化.MTT法测定生物学活性结果表明,重组犬IL-2能够极显著地促进犬外周血淋巴细胞增殖.证明酵母表达的犬重组IL-2具有良好的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张汇东		81	232	8.0	13.0
2	缪勤		31	119	6.0	9.0
3	陈溥言	农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院	5	42	4.0	5.0
4	朱骞		24	78	5.0	8.0
5	曹瑞兵	农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院	3	33	3.0	3.0
6	葛菲菲	农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室南京农业大学动物医学院	1	6	1.0	1.0