小鼠白细胞介素23基因在毕赤酵母中的诱导表达及初步活性研究

• 作者: 姚智燕 杨建岭 杨艺红 魏林
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素23 克隆表达 毕赤酵母 生物活性
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 120-123
• 分类号: R392.11
• 字数: 3844字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆小鼠白细胞介素23(mice interlecukin-23,mIL-23)基因,构建高效稳定的毕赤酵母表达菌株,并对得到的蛋白进行生物活性的初步测定.方法:采用聚合酶链式反应(PCR)技术从pcDNA3-mIL-23上分别扩增获得IL-23的两亚基p19和p40,并通过重叠PCR(over-lap PCR)技术获得含有连接子的p1940,构建pPICZαA-IL-23重组质粒;采用甲醇诱导毕赤酵母表达重组蛋白,MTT方法检测诱导表达蛋白的促淋巴细胞增殖情况.结果:SDS-PAGE分析显示在诱导24小时和36小时后的上清及24～96小时的沉淀中均可以检测到约70 kD的诱导条带.Western blot印迹法证实了重组蛋白为特异性蛋白.上清和沉淀中表达的重组蛋白IL-23能促进外周血单个核细胞的增殖,OD570 nm分别达到(0.235±0.029)和(0.216±0.035),而未刺激的对照组只有(0.135±0.008)和(0.164±0.017).结论:成功构建出mIL-23的酵母表达载体,诱导产生的蛋白可以明显地促进外周血单个核细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚智燕	河北医科大学免疫学教研室	19	33	3.0	4.0
2	杨建岭	河北医科大学免疫学教研室	13	20	3.0	4.0
3	魏林	河北医科大学免疫学教研室	46	214	8.0	12.0
4	杨艺红	河北师范大学生命科学学院分子细胞研究室	2	0	0.0	0.0