枯草芽胞杆菌重组木聚糖酶基因高效表达系统的构建

• 作者: 喻子牛 孙明 彭德奎 王丽萍 陈守文
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 枯草芽胞杆菌 木聚糖酶 同源重组 整合
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 133-137
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3923字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.01.028

摘要

以木聚糖酶基因为研究对象,构建了枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)稳定的高效表达系统.采用PCR方法从芽胞杆菌(Bacillus sp.)基因组DNA中分别扩增出完整和不带启动子的木聚糖酶(xynA)基因;利用芽胞杆菌的强启动子,即S-层蛋白的启动子,通过SOE(splicing by overlapping extension)法连接到xynA基因上得到重组基因S-xynA,将xynA和S-xynA分别装载到整合载体pDG1730上,转化α-淀粉酶高产菌株枯草芽胞杆菌B47,将重组基因整合到α-淀粉酶基因上,以期目标基因像淀粉酶基因一样高效表达.结果表明,2个重组菌的产酶活性均得到提高,其中S-层蛋白启动子表达的木聚糖酶活是自身启动子表达的酶活的1.69倍.重组表达的木聚糖酶在pH5～8和40～60 ℃范围内均具有较高活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈守文	华中农业大学农业微生物国家重点实验室	50	586	15.0	21.0
2	喻子牛	华中农业大学农业微生物国家重点实验室	134	1829	21.0	35.0
3	孙明	华中农业大学农业微生物国家重点实验室	56	655	14.0	23.0
4	王丽萍	华中农业大学农业微生物国家重点实验室	1	13	1.0	1.0
5	彭德奎	华中农业大学农业微生物国家重点实验室	1	13	1.0	1.0