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摘要:
目的:构建EBV潜伏期膜蛋白基因LMP2A的腺病毒表达载体,探讨LMP2A表达对胃癌细胞的作用.方法:RT-PCR扩增获取目的基因LMP2A,采用AdEasy系统构建携带目的基因的重组腺病毒载体pAd-2A,脂质体法将重组质粒pAd-2A转染HEK293细胞包装重组腺病毒.用重组腺病毒感染靶细胞SGC(胃癌细胞),通过MTT实验、流式细胞分析、激光共聚焦检测目的基因LMP2A表达对靶细胞增殖的影响.结果:限制性酶切、PCR及测序鉴定证实,目的基因LMP2A正确插入重组质粒,HEK293细胞成功包装出具有稳定感染性的重组腺病毒,命名为vAd-2A,经测定病毒滴度为3.16×1012 pfu/L.MTT实验、流式细胞分析以及激光共聚焦检测结果显示,感染腺病毒vAd-2A的SGC细胞增殖旺盛(感染vAd-2A细胞vs感染vAd细胞和未感染病毒细胞,P<0.01),S期细胞比例升高(24 h:35.2%±5.1% vs 14.0%±3.4%,13.2%±4.6%,P<0.01;48 h:25.6%±4.1% vs 12.9%±2.6%,12.5%±3.2%,P<0.01),LMP2A可诱导细胞周期调节蛋白cyclinE的表达.结论:成功构建了EBV潜伏期膜蛋白基因LMP2A的重组腺病毒表达载体,并在HEK293细胞中成功包装出重组腺病毒,同时证实LMP2A可通过诱导cyclinE的表达促进SGC细胞增殖.
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 EB病毒潜伏期膜蛋白LMP2A对胃癌细胞增殖的影响
来源期刊 世界华人消化杂志 学科 医学
关键词 EB病毒 重组腺病毒 LMP2A 胃癌细胞
年,卷(期) 2007,(2) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 108-113
页数 6页 分类号 R73
字数 5087字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1009-3079.2007.02.002
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 罗兵 青岛大学医学院微生物教研室 216 931 14.0 19.0
2 王云 青岛大学医学院微生物教研室 74 250 9.0 13.0
3 朱伟 济宁医学院微生物教研室 17 37 3.0 5.0
4 纪静 青岛大学医学院微生物教研室 20 74 6.0 8.0
5 高玉 青岛大学医学院微生物教研室 5 18 3.0 4.0
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研究主题发展历程
节点文献
EB病毒
重组腺病毒
LMP2A
胃癌细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
世界华人消化杂志
旬刊
1009-3079
14-1260/R
大16开
社址:山西省太原市双塔西街77号;办公地址:北京市朝阳区东四环中路62号,远洋国际中心D座903室
22-117
1993
chi
出版文献量(篇)
13630
总下载数(次)
16
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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