猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立

• 作者: 仇华吉 史子学 孙元 成丹 李娜 涂长春 童光志 赵建军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒疫苗 复合实时荧光定量RT-PCR 鉴别诊断
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 406-412
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.6|Q503
• 字数: 6386字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2007.05.011

摘要

根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针,建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT-PCR检测方法.结果显示,该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来,而不与其他猪源病毒发生非特异反应,分别可检测到初始模板中41.8和81.5个拷贝的病毒RNA,与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近,两种方法对152份样品检测的符合率达96.9%～100%.通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测,证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性,可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测.