人IL-1 Ra基因真核表达载体的构建及体外转染大鼠骨髓间充质干细胞

• 作者: 吕同德 哈小琴 常雅萍 王刚
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: IL-1Ra 基因转染 干细胞,骨髓 间充质
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 431-433
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 1898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.2007.06.012

摘要

目的:构建人IL-1Ra真核表达载体,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs).方法:从PHA活化的人外周血单个核细胞中提取总RNA,RT-PCR法获得hIL-1Ra cDNA,经HindⅢ、EcoR Ⅰ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcDNA3.经酶切分析及PCR鉴定后,脂质体介导下体外转染大鼠BM-MSCs,免疫荧光法检测hIL-1Ra在大鼠MSCs的表达.结果:获得570 bp大小的IL-1Ra cDNA片段;经酶切分析、PCR鉴定及DNA测序,证实IL-1Ra cDNA定向插入pcDNA3质粒,目的序列与GenBank源序列完全一致;脂质体介导转染48h后,免疫荧光检测到hIL-1Ra在大鼠MSCs的表达.结论:成功构建pcDNA3-hIL-1Ra真核表达载体并在大鼠BM-MSCs中表达,为进一步的hIL-1Ra基因修饰MSCs研究提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	常雅萍	吉林大学基础医学院免疫学教研室	46	363	10.0	17.0
2	王刚	吉林大学基础医学院免疫学教研室	119	711	14.0	22.0
3	哈小琴	兰州军区兰州总医院实验科	118	351	8.0	12.0
4	吕同德	兰州军区兰州总医院实验科	83	291	8.0	13.0