种子特异表达启动子的克隆分析及其植物表达载体的构建

• 作者: 乐超银 何正权 姚伟 朱亚兰 梁宏伟 梁薇 窦建华 陈发菊
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 种子特异表达启动子 克隆 油菜
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 页码范围: 6-10
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 2666字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-7091.2007.02.002

摘要

根据 GenBank 已公布的种子特异性的 Oleosin 蛋白基因启动子序列设计合成引物,利用 PCR 技术从油菜总基因组DNA中扩增出 Oleosin 基因启动子序列(SOP),将该序列克隆到pGM-T载体中,经鉴定获得pGM-T-SOP重组载体.测序和序列分析表明,该启动子序列由 899 bp核苷酸组成,其核苷酸序列与 GenBank 中的 Oleosin 基因启动子序列同源性高达95.6%.分别用限制性内切酶 Hind Ⅲ和 BamH Ⅰ双酶切重组质粒 pGMT-SOP 和双元植物表达载体 pBI121,分别回收 pGMT-SOP重组质粒中的SOP小片段和pBI121植物表达载体中去掉 CaMV35S组成型启动子的大片段,经连接、转化和鉴定,获得由 SOP驱动报告基因 GUS的新型植物表达载体 pBI121-SOP,为外源基因在油菜种子中的定位表达研究奠定基础.