p21-EGFP 融合基因表达载体与卵母细胞的表达定位

• 作者: 于秉治 具英花 宗志宏 张杰 李雪松 武迪迪
• 来源期刊: 贵阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因,p21 卵母细胞 荧光抚体技术 小鼠 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 5-8
• 页数: 4页
• 分类号: Q132.7
• 字数: 2703字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2707.2007.01.002

摘要

目的:通过构建绿色荧光蛋白p21-EGFP融合基因表达载体,观察其在小鼠卵母细胞中的表达及定位,为研究细胞周期蛋白激酶抑制因子p21对小鼠卵母细胞细胞周期的影响提供实验基础.方法:以含有p21的全长序列的质粒为模板PCR扩增p21cDNA , 应用基因重组技术与EGFP 基因融合, 构建以绿色荧光蛋白EGFP为报告基因的重组表达质粒pEGFP-p21.利用显微注射方法注射到小鼠卵母细胞中进行表达,用荧光显微镜直接观察pEGFP-p21融合蛋白在细胞中的分布和定位, Western Blot 方法检测其蛋白的表达.经酶切证实插入片断的正确性.结果:荧光显微镜观察结果显示在空载体pEGFP-C3转染的小鼠卵母细胞中,绿色荧光呈弥散分布,而经注射重组质粒pEGFP-p21 的小鼠卵母细胞中, 绿色荧光主要集中在细胞核内.同时用Western Blot 证实了pEGFP-p21 融合基因的表达.结论:成功的构建了pEGFP-p21 融合表达质粒.同时证明小鼠卵母细胞能高效表达pEGFP-p21 融合基因, 且主要定位于细胞核内.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	具英花	中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	11	29	3.0	5.0
2	宗志宏	中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	51	279	10.0	12.0
3	张杰	中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	87	228	8.0	11.0
4	武迪迪	中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	16	47	4.0	6.0
5	李雪松	中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室	5	18	3.0	4.0