坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基的表达及鉴定

• 作者: 左正宏 杨听林 王重刚 蔡嘉力 陈奕欣
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 坛紫菜 别藻蓝蛋白 原核表达 Western-blot
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 244-247
• 页数: 4页
• 分类号: S945.4
• 字数: 3298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2007.02.022

摘要

根据GenBank(AY372218)中的相关序列设计引物,通过PCR的方法从质粒pMD-apcAB中扩增坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基基因(apcB),并将其克隆到高效表达外源基因的原核表达质粒pTO-T7.将构建好的质粒导入表达型大肠杆菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,并对表达产物进行Western-blot和质谱鉴定.结果显示:apcB全长486 bp,表达的坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基(APCβ)为带有原核表达载体T7g10的12个起始氨基酸的融合蛋白,其分子量约为18.0 ku.扫描分析的结果表明,0.5 mmol/L的IPTG在37℃诱导6 h时,APCβ的表达量达到最大,达菌体总蛋白40%以上.Western-blot和质谱鉴定的结果表明获得的融合蛋白为重组坛紫菜别藻蓝蛋白β亚基.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王重刚	厦门大学生命科学学院	43	729	17.0	25.0
2	左正宏	厦门大学生命科学学院	46	480	13.0	20.0
3	陈奕欣	厦门大学生命科学学院	40	567	15.0	22.0
4	杨听林	厦门大学环境科学研究中心	5	14	3.0	3.0
8	蔡嘉力	厦门大学生命科学学院	3	4	1.0	2.0