艰难梭菌细胞毒素B功能区的原核表达及免疫原性

• 作者: 刘红升 姜泊 张清华 蒋知新
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 艰难梭菌 细胞毒素B 基因表达 蛋白质纯化 免疫原性
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1381-1384
• 页数: 4页
• 分类号: Q939.118|R517.9
• 字数: 3079字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2007.12.018

摘要

目的 纯化已表达艰难梭菌(CD)细胞毒素B羧基末端受体结合区(CD3)的基因,并检测其免疫原性.方法 PCR克隆目的基因到表达载体pET22b(+),重组质粒转化到E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,利用金属螯合色谱层析方法纯化后,SDS-PAGE方法对纯化蛋白进行分析.并检测其免疫反应性.结果 成功表达的是分子质量约为71.3 ku的重组蛋白,占菌体总蛋白的34%,可溶性表达占上清的22.7%,包涵体占沉淀的25.7%.重组蛋白纯化后可溶性蛋白浓度为0.781 g/L.并与抗毒素B抗体具有良好的免疫原性.结论 成功克隆了CD3基因,构建的重组质粒可高效表达CD3重组蛋白,为CD相关性疾病的诊断及后期制备疫苗,提供了有力的保障.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜泊	南方医科大学南方医院消化病研究所	161	1166	17.0	25.0
2	张清华	解放军305医院老年病中心	40	135	6.0	10.0
3	蒋知新	解放军305医院老年病中心	37	121	6.0	9.0
4	刘红升		3	19	2.0	3.0