裂解基因E和核酸酶基因串联表达载体的构建及大肠杆菌菌影的制备

• 作者: 王丽哲 雷连成 韩文瑜
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 噬菌体PhiX174 裂解基因E 葡萄球菌核酸酶A 菌影
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 557-561
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3167字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2007.08.002

摘要

目的 构建噬菌体裂解基因E和核酸酶基因串联表达载体,制备高质量的大肠杆菌菌影.方法 自行设计一对引物,PCR扩增PhiX174噬菌体裂解基因E,将该基因亚克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建大肠杆菌菌影的表达载体pGEX-E.在E基因基础上与辅助基因葡萄球菌核酸酶A(SN)基因串联,并插入pGEX-6P-1载体,构建双基因串联高效表达载体pGEX-E-5aaLinker-SN和pGEX- E-15aaLinker-SN,采用CaCl2法将其转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,制备大肠杆菌菌影.结果 裂解基因E单基因及串联基因已成功插入融合表达载体pGEX-6P-1,所构建的大肠杆菌菌影表达载体pGEX-E、pGEX-E-5aaLinker-SN和pGEX- E-15aaLinker-SN,诱导后经透射电镜及活菌计数显示大肠杆菌已发生不同程度裂解,制成了大肠杆菌菌影.电镜下菌影形态完整,内容物已释放到胞外.结论 已成功构建了噬菌体裂解基因E单基因及裂解基因和核酸酶基因串联基因表达载体,并制成了大肠杆菌菌影,为进一步研究菌影这一新型的疫苗及佐剂形式奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩文瑜	吉林大学畜牧兽医学院预防兽医系	159	1086	16.0	26.0
2	雷连成	吉林大学畜牧兽医学院预防兽医系	131	764	13.0	21.0
3	王丽哲	吉林大学畜牧兽医学院预防兽医系	4	35	3.0	4.0