实时荧光定量PCR检测莫氏立克次体

• 作者: 孙长俭 李青凤 杨晓 温博海 牛东升 陈梅玲
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 莫氏立克次体 实时定量PCR 外膜蛋白B基因 地方性斑疹伤寒
• 年，卷（期）: 2007,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1054-1056
• 页数: 3页
• 分类号: R376
• 字数: 3221字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.10.016

摘要

目的 采用TaqMan-MGB探针建立检测莫氏立克次体的实时荧光定量PCR.方法 依据莫氏立克次体外膜蛋白B基因(ompB)设计引物和探针,以克隆的ompB作模板建立实时荧光定量PCR方法.结果 建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.995);该方法能检出＜10拷贝的莫氏立克次体DNA,敏感性为普通PCR的1 000倍.用该方法检测莫氏立克次体DNA,结果为阳性,但是检测其他相关细菌DNA的结果均为阴性.用该方法检测莫氏立克次体感染豚鼠血标本,50%样本检测为阳性,而普通PCR检测结果均为阴性.结论 该实时荧光定量PCR具有很高的特异性和敏感性,适合于快速检测样本中微量莫氏立克次体DNA,可用于临床实验室快速确诊地方性斑疹伤寒.