实时荧光定量PCR检测斑点热立克次体方法的建立

• 作者: 任翠平 余东阳 刘伯玉 朱禹 杨莉 柳燕 罗婉蓉 陈振 高越
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 斑点热立克次体 ompA TaqMan探针 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 1008-1013
• 页数: 6页
• 分类号: R376.3
• 字数: 4163字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.07.005

摘要

目的 建立斑点热群立克次体(SFGR)TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)快速检测方法 .方法 根据日本斑点热立克次体外膜蛋白A(ompA)基因序列设计特异性引物和探针,建立基于TaqMan探针的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,用建立的此检测方法和常规的巢式PCR方法同时对临床收集的80份患者血标本进行检测并比较两者结果 .结果 成功建立了检测SFGR的实时荧光定量PCR方法,标准曲线的循环阈值与模板拷贝数均呈良好的线性关系(r>0.99),且在检测SFGR核酸样本时具有良好的灵敏度、特异性和重复性.结论 该研究建立了基于TaqMan探针检测SFGR的实时荧光定量PCR检测方法,为临床实验室快速确诊SFGR疾病提供了快速、有效的技术手段.