H3N2亚型禽流感病毒核蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 周晓巍 屈孝初 李文平 杨志新 柳斌 黄培堂
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 禽流感病毒 核蛋白 原核表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 419-422
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.03.017

摘要

目的:获得H3N2亚型禽流感病毒核蛋白(NP)全长基因,并在大肠杆菌中表达,以用于对NP功能的研究.方法:从感染了H3N2亚型禽流感病毒的MDCK细胞培养液中收获病毒,提取病毒RNA,用RT-PCR扩增出NP基因的编码区序列,将其定向克隆到pTIG-TRX原核表达载体并测序,在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达,用SDS-PAGE和Western印迹检测表达产物.结果:所克隆的核苷酸片段包含了NP基因编码区完整阅读框架,编码498个氨基酸;构建的重组表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中表达出相对分子质量约66 000的重组蛋白.结论:克隆和表达了禽流感病毒核蛋白编码区基因,为获得大量NP以制备抗体,以及对其进行功能性研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄培堂	军事医学科学院生物工程研究所	190	1493	20.0	30.0
2	周晓巍	军事医学科学院生物工程研究所	43	220	8.0	13.0
3	李文平	湖南农业大学动物科技学院	111	731	15.0	20.0
4	屈孝初	湖南农业大学动物科技学院	25	224	9.0	14.0
5	柳斌	军事医学科学院生物工程研究所	2	0	0.0	0.0
9	杨志新	军事医学科学院生物工程研究所	8	33	3.0	5.0