特异性沉默Eca109细胞系stathmin基因 siRNA表达载体的构建

• 作者: 樊青霞 王峰 王瑞林 王留兴 赵培荣
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: 小干扰RNA stathmin基因 pSUPER-EGFP载体 Eca109细胞
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 549-552,643
• 页数: 5页
• 分类号: R735.1
• 字数: 3196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2007.08.001

摘要

目的 构建并筛选特异性沉默stathmin基因的pSUPER-S逆转录病毒载体以及稳定表达的细胞克隆.方法 用DNA重组技术,将64nt能转录产生靶向stathmin小发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸序列,定向克隆入逆转录病毒载体pSUPER-EGFP,应用脂质体将重组逆转录病毒载体pSUPER-S转染细胞系Eca109,G418筛选建立稳定产生逆转录病毒的细胞克隆,RT-PCR检测转染细胞stathmin mRNA的表达.结果 重组逆转录病毒载体经EcoRⅠ、Hind Ⅲ双酶切,可见4692 nt和285 nt条带;测序结果表明插入序列正确;重组载体转染Eca109细胞,可表达绿色荧光蛋白(EGFP),经G418筛选得到抗性细胞克隆,转染细胞stathmin mRNA的表达较对照组明显减弱.结论 特异性沉默stathmin基因的pSUPER-S逆转录病毒载体以及稳定表达的细胞系构建和筛选成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊青霞	郑州大学第一附属医院肿瘤科	283	1373	16.0	22.0
2	王瑞林	郑州大学第一附属医院肿瘤科	104	533	11.0	16.0
3	王留兴	郑州大学第一附属医院肿瘤科	158	792	14.0	19.0
4	王峰	郑州大学第一附属医院肿瘤科	120	477	11.0	17.0
5	赵培荣	郑州大学第一附属医院肿瘤科	50	299	8.0	14.0