Muc3羧基端SEA组件完整性与蛋白酶切的关系

• 作者: 房殿春 汪荣泉
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黏蛋白类 蛋白酶切 SEA组件 脱糖基化
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 726-728
• 页数: 3页
• 分类号: R34
• 字数: 3149字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2007.07.023

摘要

目的 探讨大鼠黏蛋白3(Muc3)羧基端SEA组件的完整性与蛋白酶切的关系.方法 对截断了的大鼠Muc3的羧基端(p20t和p20SEA)采用定点突变的方法在所要求的位点插入终止密码子,采用SDS/PAGE和Western blot方法检测蛋白表达,N-glycosidase F消化法对表达蛋白质行脱N型糖链.结果 Muc3完整的羧基端产物翻译后经蛋白酶切产生30kD的氨基端酶切片段和49kD的羧基端酶切片段,30kD的氨基端酶切片段经脱N型糖链后分子量变为22kD;含完整SEA组件但不含SEA组件后续氨基酸的截断大鼠Muc3羧基端用V5抗体可以检测到30kD的表达产物,脱N型糖链后分子量变为22kD;含不完整SEA组件的截断的大鼠Muc3羧基端用V5抗体可以检测到26～30kD的表达产物,脱N型糖链后分子量变为26kD.结论 Muc3完整的羧基端产物和SEA组件完整但不含SEA组件后续氨基酸的大鼠Muc3羧基端均在翻译后经历了蛋白酶切,但是SEA组件不完整的大鼠Muc3羧基端在翻译后未能出现蛋白酶切,提示SEA组件完整性是Muc3羧基端蛋白酶切反应发生的一个重要条件.