血管形成抑制剂Canstatin在鼻咽癌中表达鉴定及基因克隆

• 作者: 刘求真 刘真 刘腾飞 周宏珍 姚开泰 方唯意 李欣 杨慧玲 江庆萍 王爽 谢思明
• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: Canstatin 胶原Ⅳ 鼻咽癌 血管生成抑制因子
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 813-816
• 页数: 4页
• 分类号: R739.63
• 字数: 2805字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2007.06.002

摘要

目的 检测Canstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列.方法 利用半定量RT-PCR方法检测Canstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异.设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Can-statin蛋白编码序列,T/A克隆入Pmd18载体中.利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子.重组子最后经测序证实.结果 与相对正常鼻咽组织相比,Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失.RT-PCR法成功获得Canstatin基因编码区全长Cdna序列.重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与Gen-Bank中Canstatin基因相应序列比较,100%同源.结论 Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失.采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Canstatin基因,为Canstatin亚克隆入真核表达载体Pegfp-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础.