大鼠辣椒素受体的重组

• 作者: 孙丽新 张陆勇 陈敏
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 基因表达 辣椒素受体 转染 重组
• 年，卷（期）: 2007,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 773-776,封3
• 页数: 5页
• 分类号: Q784
• 字数: 3256字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-6611.2007.09.002

摘要

目的 构建辣椒素受体(vanilloid receptor 1,VR1)真核表达载体,用以研究VR1的功能.方法 从大鼠的背根神经节中提取总RNA,逆转录为cDNA,以此为模板,用VR1特异性的引物扩增,随后将PCR产物插入T-easy载体,经酶切鉴定和测序,与GenBank序列比对.再将正确序列亚克隆至表达载体pEGFP-C3并鉴定.运用脂质体转染的方法,将构建好的表达载体pEGFP-C3-VR1转染到人胚胎肾细胞(HEK-293)中,用荧光显微镜观察报告基因绿色荧光蛋白的表达,通过免疫组化的方法确定目的 蛋白VR1的表达.结果 克隆的大鼠VR1核苷酸序列与GenBank公布的序列AB040873和AF029310的编码区同源性分别达到99.92%和99.84%.转染24 h后,绿色荧光蛋白和VR1均表达.结论 重组的VR1真核表达载体构建基本正确,并在HEK-293细胞中成功表达,为进一步研究其功能作了准备.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张陆勇	中国药科大学新药筛选中心	148	1261	19.0	28.0
2	陈敏	山西医科大学药理教研室	30	144	7.0	10.0
3	孙丽新	中国药科大学新药筛选中心	10	32	3.0	5.0