尿路致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛fimH和fimC基因原核表达质粒的构建及表达

• 作者: 冯惠东 尹晓琳 王秀荣 石新丽 马翠卿 魏林
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 尿路致病性大肠杆菌 Ⅰ型菌毛 fimH和fimC基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2007,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1131-1134
• 页数: 4页
• 分类号: R378.21
• 字数: 2987字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.11.017

摘要

目的 构建以尿路致病性大肠杆菌(UPEC)Ⅰ型菌毛编码基因fimH 和fimC为目的基因的原核重组表达质粒,诱导其在E.coli BL-21中表达,并对其免疫原性进行分析.方法 PCR法自UPEC标准菌株J96获取 fimH和fimC 基因,分别插入原核表达载体pGEX-4T-2;将重组表达质粒转染感受态E.coli BL-21,经IPTG诱导表达、SDS-PAGE 和Western blot鉴定并纯化目的蛋白fimH和fimC蛋白,定量后免疫BALB/c小鼠,动态检测抗体产生水平.结果 PCR法克隆出全长为903bp的fimH和720bp的fimC基因,构建的原核表达质粒pGEX-4T-2-fimH及pGEX-4T-2-fimC经诱导可分别表达出60KD和48KD左右的GST融合蛋白;蛋白经纯化后免疫动物能诱导产生高效价的IgG抗体.结论 成功获取了UPECⅠ型菌毛基因fimH和fimC,所构建的原核表达质粒在BL-21中成功表达;fimH有免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马翠卿	河北医科大学免疫教研室	20	85	5.0	9.0
2	尹晓琳	河北医科大学免疫教研室	38	331	10.0	17.0
3	王秀荣	河北医科大学免疫教研室	22	68	5.0	7.0
4	魏林	河北医科大学免疫教研室	46	214	8.0	12.0
5	冯惠东	河北医科大学免疫教研室	16	52	5.0	6.0
6	石新丽	河北医科大学免疫教研室	2	10	1.0	2.0