葡萄糖脱氢酶基因的重组和表达研究

• 作者: 周丽萍 徐军
• 来源期刊: 检验医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 葡萄糖脱氢酶 基因 重组 表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 81-82
• 页数: 2页
• 分类号: Q784|Q786
• 字数: 1961字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-9455.2007.02.001

摘要

目的 为获得较高活力的葡萄糖脱氢酶.方法 根据枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因两端序列设计引物,以枯草芽孢杆菌WB600基因组DNA为模板,通过聚合酶链反应(PCR)获得该基因,与表达载体pET 22b连接后转化至大肠杆菌JM109(DE3)进行表达,并在半自动生化分析仪上用速率法测定其活性.结果 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,重组菌能表达单体分子量为31.5 kD的特异性蛋白.通过对重组基因表达条件的研究发现,诱导剂(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)浓度为0.5 mmol/L,诱导2.5～3 h后用240 W超声破碎细胞,可实现该基因的较高表达.结论 运用基因工程手段获得了葡萄糖脱氢酶基因,重组基因经大肠杆菌诱导表达,获得了较高活力的葡萄糖脱氢酶,经纯化后可为临床服务.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周丽萍	江苏大学医学技术学院	33	163	7.0	10.0
2	徐军		12	118	4.0	10.0