慢病毒载体携带的VEGFR2shRNA对HL60的体外杀伤作用

• 作者: 夏焱 徐令 李文益 梁立阳 苏浩彬 郭海霞 黎阳
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: siRNA HL60细胞 受体,血管内皮生长因子
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1053-1057
• 页数: 5页
• 分类号: R361
• 字数: 3343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2007.06.004

摘要

目的:为寻找高效低毒的选择性抗白血病药物,研究慢病毒载体携带的血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因短发夹RNA(shRNA)对肿瘤细胞株HL60的体外杀伤作用.方法:制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA,并据此设计shRNA寡核苷酸链,构建pU6/shVEGFR2入门克隆.瞬时转染细胞,采用MTT法、RT-PCR法及Western blotting测定VEGFR2表达抑制情况.构建表达克隆,与ViraPowerTM Packaging Mix共转染到293FTTM细胞中,产生携带Lenti6/shVEGFR2的慢病毒载体.将病毒上清加入HL60细胞中转导,测定HL60细胞抑制率并与pU6/shVEGFR2入门克隆脂质体转染结果比较.结果:VEGFR2 siRNAc抑制HL60细胞效率最高,利用其shRNA和pENTRTM/U6构建的入门克隆转染HL60,抑制细胞效率达84.9%;显著抑制HL60细胞VEGFR2基因mRNA和蛋白的表达.pU6/shVEGFR2入门克隆转染、Lenti6/shVEGFR2表达克隆转导HL60细胞后48 h细胞抑制率相近,48 h后入门克隆转染组细胞抑制率明显下降;而表达克隆转导组细胞抑制率变化缓慢,在96 h达高峰,120 h 稍降,变化无显著差异.结论:在体外慢病毒载体携带的VEGFR2 shRNA可有效阻断HL60细胞VEGF/VEGFR2自分泌链,有效抑制白血病生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁立阳	中山大学附属第二医院儿科	89	276	8.0	13.0
2	李文益	中山大学附属第二医院儿科	73	434	11.0	16.0
3	夏焱	中山大学附属第二医院儿科	35	239	9.0	13.0
4	郭海霞	中山大学附属第二医院儿科	64	231	8.0	11.0
5	苏浩彬	中山大学附属第二医院儿科	62	342	10.0	15.0
6	黎阳	中山大学附属第二医院儿科	83	319	9.0	13.0
7	徐令	中山大学附属第二医院医学研究中心	20	106	7.0	9.0