猪流行性腹泻病毒LJB/03地方株核蛋白基因序列分析及其原核表达

• 作者: 姜艳萍 李一经 李宝贤 葛俊伟 裴敦国
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 N基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 12-14
• 页数: 3页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3333字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7034.2007.03.005

摘要

以猪腹泻粪便样品提取RNA,应用RT-PCR方法扩增获得了PEDV地方株LJB/03核衣壳蛋白(N)全基因序列,测序结果表明:N基因全长1 326 bp,编码441个氨基酸,包含405个腺嘌呤(30.5%)、329个鸟嘌呤(24.8%)、294个胞嘧啶(22.2%)和298个胸腺嘧啶(22.5%).与已发表的序列相比,LJB/0 3株N基因和其他分离株核苷酸的同源性在95%以上,与JS2004、chinju99、Br1/87、CV777同源性分别是97.4%、95.6%、96.6%、96.8%;氨基酸同源性在96.5%以上,与JS2004、chinju99、Br1/87、CV777的同源性分别是98.0%、96.90%、96.1%、96.4%.序列分析表明:N蛋白包含7个潜在的蛋白激酶C磷酸化位点、9个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点和2个依赖cAMP和cGMP的蛋白激酶磷酸化位点.将N基因定向克隆到原核表达载体pGEX-6p-1,转化宿主菌BL21中,经IPTG诱导后,N基因得以表达.表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,确定表达的融合蛋白大小约为75 ku,且具有良好的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李一经	东北农业大学动物医学学院	219	1679	20.0	27.0
2	裴敦国	东北农业大学动物医学学院	2	27	2.0	2.0
3	葛俊伟	东北农业大学动物医学学院	74	425	11.0	17.0
4	姜艳萍	东北农业大学动物医学学院	9	53	4.0	7.0
5	李宝贤	东北农业大学动物医学学院	5	16	2.0	4.0