自制肝素亲和柱分离纯化载脂蛋白H及其抗体制备与鉴定

• 作者: 张春妮 汪俊军 王相栋 田迎
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 亲和层析 肝素 载脂蛋白H 抗体 纯化与鉴定
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 931-934,942
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3683字
• 语种: 中文

摘要

目的:自制肝素-琼脂糖6B亲和柱提纯人血清载脂蛋白H (apoH),免疫制备多克隆抗体,为大量制备与进一步研究做准备.方法:利用间接还原胺化法制备亲和层析柱,并优化反应条件.运用高氯酸沉淀、离子交换及亲和层析从人血清中纯化抗原,制备兔源多克隆抗体.结果:自制亲和柱肝素结合量约5 mg/g (介质体积).纯化的抗原经SDS-PAGE鉴定分子量约50 kD,无杂带;16种氨基酸组成分析结果与报道一致.多克隆抗体与购置的国外抗体一样,在进行ELISA与dot-ELISA时与小牛血清白蛋白有交叉反应;但在变性且还原的条件下,Western blot结果显示无交叉反应.结论:自制亲和柱成本低、亲和性好、肝素结合稳定,用之分离纯化得到了高纯度apoH;兔多克隆抗体用于检测血清中载脂蛋白H含量时需进一步纯化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪俊军	南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院检验科	10	38	5.0	5.0
2	张春妮	南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院检验科	12	62	5.0	7.0
3	王相栋	南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院检验科	1	7	1.0	1.0
4	田迎	南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院检验科	1	7	1.0	1.0