抗人载脂蛋白6单链抗体的筛选、制备及活性鉴定

• 作者: 冯巍 詹飞 陈炯
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体展示 人载脂蛋白6 单链抗体
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1224-1228
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4475字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2020.10.014

摘要

目的:筛选特异性抗人载脂蛋白6单链抗体(anti-hLCN6 scFv),并进行表达纯化和活性鉴定.方法:采用RT-PCR技术,用抗体可变区简并引物,从hLCN6免疫小鼠的淋巴细胞中扩增全套VH和VL基因,装配成scFv基因后将其克隆到噬菌体载体pFAB5C中,构建scFv噬菌体抗体库.对抗体库进行4轮富集,筛选抗hLCN6阳性scFv.经原核表达纯化后,用Western blot和间接ELISA对其活性进行鉴定.结果:筛选到2株亲和力较高的阳性克隆,测序表明其序列一致.获得了高纯度的scFv抗体,其对抗原具有良好的亲和力和特异性.结论:成功筛选到特异性抗hLCN6 scFv,为利用该抗体进行混合斑中的精子分离奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈炯	河南科技大学法医学院	6	3	1.0	1.0
2	詹飞	河南科技大学法医学院	5	4	1.0	1.0
3	冯巍	河南科技大学法医学院	6	2	1.0	1.0