叶锈菌侵染诱导产生的小麦Wrab17蛋白的原核表达、纯化及其抗体制备

• 作者: 张恒 杨高山 王冬梅 王帅帅 韩胜芳
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: 叶锈菌 Wrab17基因 原核表达 诱导表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 1-6
• 页数: 6页
• 分类号: S435.121
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2015.0025

摘要

叶锈菌(Puccinia triticina)引起的小麦叶锈病是影响世界小麦生产的重要病害之一.研究小麦抗叶锈相关防卫蛋白的表达,对于深入研究小麦对叶锈菌的抗病机制,更好地为农业生产服务,具有重要意义.Wrab17 (Wheat response to ABA)是一个冷胁迫诱导蛋白,前期工作通过构建叶锈菌侵染早期的小麦SSH文库及ESTs序列分析,筛选到Wrab17基因在不亲和组合接种后早期显著上调表达,初步表明Wrab17基因可能参与了小麦抗叶锈菌侵染过程,这是首次发现Wrab17参与抗病反应.本研究进一步利用RT-PCR技术从接种叶锈菌的小麦叶片中克隆获得了Wrab17基因的CDS区,构建了Wrab17蛋白原核表达载体,并在大肠杆菌中高效表达Wrab17蛋白.利用镍柱亲和层析方法获得了纯度较高的重组蛋白,将融合蛋白纯化后制备其兔抗血清,得到特异性较好的多克隆抗体.为进一步通过Western Blotting技术检测Wrab17在小麦被叶锈菌侵染后不同时间点表达量的变化,明确Wrab17参与小麦抵抗叶锈菌侵染的防卫反应奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩胜芳	河北农业大学生命科学学院	35	510	13.0	21.0
2	王冬梅	河北农业大学生命科学学院	99	919	17.0	24.0
3	王帅帅	河北农业大学生命科学学院	11	57	5.0	7.0
4	张恒	河北农业大学生命科学学院	10	21	3.0	4.0
5	杨高山	河北农业大学生命科学学院	2	10	2.0	2.0